该研究通过基于表面等离子共振成像(SPRi)技术的多肽阵列筛选[3]、等温量热滴定(ITC)和结构生物学等方法发现HBx的N端保守序列(第2-21位的氨基酸,HBx2-21)可以与Spindlin1蛋白的第3个Tudor结构域互作,并解析了Spindlin1-HBx2-21复合物的晶体结构。接着,通过结构分析、生化结合以及细胞实验发现,HBx蛋白与Spindlin1第3个Tudor的结合可以与Spindlin1第1和第2个Tudor结构域对组蛋白甲基化修饰的识别很好的共存。有意思的是,体外ITC实验表明与HBx结合后,Spindlin1对组蛋白H3“K4me3-K9me3”二价修饰的识别能力提高了3.5倍,亲和力高达3.8 纳摩尔,欧博官网是迄今报导的最强组蛋白修饰识别事件。接着,研究者利用李文辉教授课题组发现并建立的HBV感染HepG2-NTCP细胞模型[4, 5]开展了一系列功能实验。研究表明Spindlin1-HBx互作可以促进HBV cccDNA的转录,并且这种促进作用与HBV cccDNA微染色体从H3K9me3标志的异染色质状态向以H3K4me3和乙酰化修饰标志的活跃染色质状态的转变有关。值得一提的是,该研究还发现Spindlin1与HBx的N端保守序列互作会影响HBx蛋白构象的改变,将HBx构象从折叠的不活跃状态转变为伸展的活跃状态,进而促进HBx与其它互作因子如DDB1 [6]和Bcl-2 [7]等的结合来协同调控HBV基因组的活化。
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